注意:因業務調整,暫不接受個人委托測試,望見諒。
北檢(北京)檢測技術研究院可以針對組織樣品、血液樣品、支氣管肺泡灌洗液、細胞樣品等進行檢測,可提供病理學評估、免疫組化分析、肺功能評估、氣道反應性評估、分子生物學分析、炎癥因子檢測等檢測服務,能夠針對國標、美標等檢測標準對樣品進行檢測,北檢院專注科研測試,致力于推動科技進步,出具的肺纖維化動物模型的檢測報告多方認可。
檢測樣品
倉鼠
兔子
組織樣品:肺組織樣品是評估肺纖維化程度和病理變化的主要樣本。可以通過動物模型誘導肺纖維化后,取得動物的肺組織樣品進行病理學分析和分子生物學研究。
血液樣品:血液樣品可以用于評估肺纖維化相關的生物標志物和炎癥因子的變化。通過采集動物的血液樣品,可以進行血清生化分析、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)等實驗。
支氣管肺泡灌洗液(BALF):BALF是通過灌洗動物支氣管肺泡腔獲得的液體樣本。它可以提供肺部炎癥細胞、細胞因子和蛋白質等的信息,用于評估肺纖維化的炎癥程度和炎癥相關因子的變化。
細胞樣品:在某些情況下,可以采集肺部相關細胞樣品,如肺泡巨噬細胞、肺間質細胞等,用于細胞學研究、免疫細胞分析和分子生物學實驗。
檢測項目
病理學評估;免疫組化分析;炎癥因子檢測;肺功能評估;氣道反應性評估;分子生物學分析
檢測方法
病理學檢測:通過對動物肺組織進行組織切片、染色和顯微鏡觀察,評估肺纖維化的程度和病理變化。常用的染色方法包括Masson's Trichrome染色、Sirius Red染色等。
免疫組化分析:使用免疫組化技術,檢測和定量肺組織中與纖維化相關的標志物。這可以通過特定抗體的染色反應來觀察和定位纖維化標記物,如膠原蛋白、纖維連接蛋白等。
分子生物學分析:使用分子生物學技術,如實時定量聚合酶鏈式反應(qPCR)、免疫印跡等,檢測和定量肺組織中的基因表達變化。這可以用于評估纖維化相關基因、炎癥相關基因等的表達水平。
支氣管肺泡灌洗液(BALF)分析:通過灌洗動物的支氣管肺泡腔,收集BALF樣本。該樣本可以用于評估炎癥細胞的數量和類型,以及炎癥因子的水平。
肺功能評估:使用肺功能測試儀器,如強迫呼氣容積(FEV1)、肺活量(VC)等,評估肺纖維化對呼吸功能的影響。
免疫學分析:通過酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、流式細胞術等方法,檢測和定量肺組織、血液樣品或BALF中的炎癥因子、細胞因子等。
影像學評估:使用X射線、計算機斷層掃描(CT)、磁共振成像(MRI)等影像學技術,評估肺纖維化的程度和肺部結構的變化。
檢測儀器
顯微鏡
流式細胞儀
檢測標準
參考文獻:
SD大鼠細胞因子過表達法致肺纖維化模型步驟
前期準備:AdTGF-β1223/225 及腺病毒空載體 -70℃保存,臨用前經病毒稀釋液稀釋成 1×109pfu(病毒稀釋液由三種溶液構成,其配制方法:A 液:NaCl 8 g,KCl 0.2 g,Na2HPO4 1.15 g,KH2PO4 0.2 g,加雙蒸水定容至100 mL,高壓消毒;B 液:CaCl2·2H2O 0.1 g 定容至 10 mL,高壓消毒;C 液:MgCl2·6H2O 0.1 g 定容至 10 mL,高壓消毒。用前取 98 mL A 液、1 mL B 液、1 mL C 液混合備用。
操作步驟:選用 SD 大鼠,體質量(250±15) g,腹腔注射速眠新麻醉(0.4 mL·kg-1),無菌操作,剪開頸部皮膚,鈍性分離頸部肌肉,充分暴露氣管,經喉頭下一次性注入 0.4 mL AdTGF-β1223/225 腺病毒液,手術 6 h 后觀察并記錄動物生理反應。
模型驗證:分別與造模后 d 7、d 14、d 21,麻醉后開胸,左心室插管,先灌流溫熱(室溫)生理鹽水,剪開右心耳放血,待流出液變澄清后再緩慢灌流 4% 多聚甲醛水溶液(200 mL·30 min-1)。小心摘取整個肺和心,經氣管恒壓(2 452 Pa)灌注 4% 多聚甲醛固定液 10 min,使肺泡恢復擴張狀態。沿縱軸切取肺組織浸入 4% 多聚甲醛固定液中固定 24 h,做常規石蠟包埋、石蠟切片、HE 染色和 Mallory 染色,光鏡觀察、攝片。
靶向Ⅱ型肺泡上皮細胞損傷法
靶向Ⅱ型肺泡上皮細胞損傷法是利用轉基因技術將白喉毒素受體與Ⅱ型肺泡上皮細胞啟動子通過載體融合,白喉毒素不斷刺激轉基因小鼠,致肺纖維化。通過敲除特定基因或導入突變基因使基因突變也能建立肺纖維化動物模型,與肺纖維化有關的基因包括:肺表面活性蛋白C、肺表面活性蛋白A2(SFTPA2)、端粒酶逆轉錄酶(TERT)和端粒酶 RNA復合酶(TERC)。
轉基因方法的優勢:基因技術造模方法比較于傳統造模方法,靶點明確,對篩選抗纖維化藥物意義重大。除此之外,通過誘導時間特定啟動子,可模擬肺纖維化晚期出現的臨床癥狀。
轉基因方法的劣勢:介導轉基因用的病毒載體本身具有潛在危害性,且人類肺纖維化是多基因多種因子作用的結果,因此單一的基因模型與多基因相關的肺纖維化模型存在一定差異。
檢測流程
1、收到客戶的檢測需求委托。
2、確立檢測目標和檢測需求
3、所在實驗室檢測工程師進行報價。
4、客戶前期寄樣,將樣品寄送到相關實驗室。
5、工程師對樣品進行樣品初檢、入庫以及編號處理。
6、確認檢測需求,簽定保密協議書,保護客戶隱私。
7、成立對應檢測小組,為客戶安排檢測項目及試驗。
8、7-15個工作日完成試驗,具體日期請依據工程師提供的日期為準。
9、工程師整理檢測結果和數據,出具檢測報告書。
10、將報告以郵遞、傳真、電子郵件等方式送至客戶手中。
檢測實驗室(部分)
檢測優勢
1、綜合性檢測技術研究院等多項榮譽證書。
2、檢測數據庫知識儲備大,檢測經驗豐富。
3、檢測周期短,檢測費用低。
4、可依據客戶需求定制試驗計劃。
5、檢測設備齊全,實驗室體系完整
6、檢測工程師專業知識過硬,檢測經驗豐富。
7、可以運用36種語言編寫MSDS報告服務。
8、多家實驗室分支,支持上門取樣或寄樣檢測服務。
結語
以上是關于肺纖維化動物模型檢測的檢測服務介紹,僅展示了部分檢測樣品和檢測項目,如有其它需求或疑問請咨詢在線工程師。